1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( A )
①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖体 A、①②③④ B、②③④⑤ C、①③④⑤ D、①②③⑥
2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为（ D ）
A、0.3-1mmol/L B、0.5-1mmol/L C、0.3-2mmol/L D、0.5-2mmol/L
3、多重PCR需要的引物对为（ D）
A、一对引物 B、半对引物 C、两对引物 D、多对引物
4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应，其特异性决定因素为（ B） A、模板 B、引物 C、dNTP D、镁离子
5、在PCR反应中，下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增( C ) A、TaqDNA聚合酶加量过多 B、引物加量过多
C、A、B都可 D、缓冲液中镁离子含量过高
6、PCR技术的发明人是（A ）
A、Mullis B、史蒂文.沙夫 C、兰德尔.才木
7、PCR产物短期存放可在（ A ）保存。 A、4℃ B、常温 C、-80℃ D、高温
8、PCR产物长期储存最好置于（ D ）。 A、4℃ B、常温 C、16℃ D、-20℃
9、PCR的基本反应过程包括（A ）
A、变性、退火、延伸 B、变性、延伸 C、变性、退火
10、在实际工作中，基因扩增实验室污染类型包括( D )
A、扩增产物的污染 B、天然基因组DNA的污染 C、试剂污染和标本间交叉污染 D、A、B、C都可能
11、PCR技术于哪一年发明（ A ）
A、1983 B、1971 C、 1987 D、1993
12、Taq DNA聚合酶酶促反应最快最适温度为（C ）
A、37℃ B、50-55℃ C、70-75℃ D、80-85℃
13、以下哪种物质在PCR反应中不需要（ D ）
A、Taq DNA聚合酶 B、dNTPs C、镁离子 D、RNA酶
14、PCR检测中，经过n个循环的扩增，拷贝数将增加（ C ） A、n B、2n C、2n D、n2
15、PCR基因扩增仪最关键的部分是（ A ）
A、温度控制系统 B、荧光检测系统 C、软件系统 D、热盖
16、以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则（ A ） A、各区合并 B、注意风向 C、因地制宜 D、方便工作
17、PCR实验室一般包括( D )
A、试剂准备区B、标本制备区 C、扩增区和产物分析区 D、A、B、C都含
18、PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的（D）。
A、白细胞DNA B、病毒蛋白质 C、血浆抗体 D、病毒核酸
19、如果反应体系中加入模板DNA分子100个，则经过30个循环后，DNA分子的数量将达到（ D ）个。
A、100×30 B、100×30×2 C、100×302 D、100×230
20、PCR扩增产物的分析方法主要有（ D ）
A、凝胶电泳分析法 B、点杂交法 C、荧光探针定量PCR法 D、A、B、C都是
二、判断题（共20题，每题2分）
1、PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间间取得平衡。（√ ） 2、在PCR反应中，dATP在DNA扩增中可以提供能量，同时作为DNA合成的原料。（ √ ）
3、DNA扩增过程未加解旋酶，可以通过先适当加温的方法破坏氢键，使模板DNA解旋。（√ ）
4、PCR反应中，复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成。（√ ）
5、PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。（√ ） 6、PCR技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等。（√ ） 7、PCR技术需在体内进行。（×）
8、PCR反应体系中的缓冲液相当于细胞中的体液。（√） 9、核酸的复制是由5＇——→ 3＇方向进行的。（√） 10、配对的碱基总是A与T和G与C。（√） 11、HBsAg转阴性后一段时间才出现可检测的HBsAb，此段间隔期称之为“窗口期”。（√）
12、市面上多数试剂用淬灭基团Q基团和报告基团R基团来标记荧光定量PCR
的探针。（√）
13、PCR反应体系中Mg2+的作用是促进Taq DNA聚合酶活性。（√） 14、若标本中含有蛋白变性剂（如甲醛），PH、离子强度、Mg2+等有 较大改变都会影响Taq酶活性。（√）
15、每个子代DNA分子中均保留一条亲代DNA链和一条新合成的DNA链，这种复制方式称之为半保留复制。（√）
16、发生溶血的标本对PCR结果没影响。（×）
17、“平台效应”是描述PCR后期循环产物对数累积趋于饱和。（√） 18、逆转录聚合酶链式反应（reverse transcription-PCR，RT-PCR）就是在应用PCR方法检测RNA病毒时，以RNA为模板，在逆转录酶的作用下形成cDNA链，然后以cDNA为模板进行正常的PCR循环扩增。（√）
19、在定量PCR中，72℃这一步对荧光探针的结合有影响，故去除，实际上55℃仍可充分延伸，完成扩增复制。（√）
20、PCR可应用于遗传病、肿瘤及病原体检测三大方面（√） 三、简答(共两题，每题10分) 1、PCR技术
答：PCR技术是用一对寡聚核苷酸作为引物（要点1：2分），通过高温变性、低温退火、中温延伸（要点2：5分）这一周期的多次循环，使特异的DNA片段数量指数倍数增加（要点3：3分）。 2、简述定量PCR检测操作的全过程。
答：标本的采集，保存（2分）——→样品前处理（2分）——→待样品充分裂解后点样上机反应（2分）——→反应结束后观察结果（2分）——→发报告（2分）
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